Contrôle de la quantité et de la qualité de la semence: Le comptage exact du nombre de spermatozoïdes
Le comptage exact du nombre de spermatozoïdes dans un hématimètre est une technique précise si elle est effectuée soigneusement. Cette technique est la plus précise pour la détermination de la concentration spermatique. Elle requiert toutefois du temps et de la patience et ne peut donc pas être mise en œuvre dans les conditions de routine d'un centre d'µInsémination Artificielle.
Les différentes étapes à suivre pour un comptage à l'hématimètre sont les suivantes: Prélever 0,01 ml de semence pure et la diluer dans 4 ml de sérum physiologique formolé, puis homogénéiser la solution. Préparer l'hématimètre en pressant fortement la lamelle sur les côtés de la grille, après avoir nettoyé et séché soigneusement les surfaces concernées. Cette manipulation permet de faire adhérer la lamelle à l'hématimètre. Avec une pipette Pasteur, rincée au préalable avec la solution contenant les spermatozoïdes, déposer une petite goutte de solution sans bulle d'air, en bordure de la lamelle. La gouttelette, par capillarité, se répartit alors entre lame et lamelle. Laisser reposer quelques minutes afin que les spermatozoïdes se déposent sur le fond de la lame. Placer avec soin l'hématimètre sur la platine du microscope, sous contraste de phase avec un grossissement de 200. Le champ du microscope couvre généralement la surface d'un grand carreau. Compter au moins 10 grands carreaux par grille et trois à quatre grilles par éjaculat. L'utilisation d'un spectrophotomètre est la technique la plus efficace car elle allie rapidité et précision. Le principe général est de mesurer la densité optique de la solution saline formolée précédente, contenant les spermatozoïdes, et de la comparer à un blanc. Avant d'utiliser cette technique dans des conditions de routine, il est nécessaire d'obtenir une courbe standard en utilisant 20 à 50 échantillons de concentrations différentes et connues en spermatozoïdes, déterminées au préalable à l'aide de l'hématimètre.
#Génétique #Bien_être_animale #Conseils_En_Elevage #Elevage
SOURCE: www.fao.org
Lire aussi Contrôle de la quantité et de la qualité de la semence: Volume et concentration de l'éjaculat à l’adresse www.talkag.com
Les différentes étapes à suivre pour un comptage à l'hématimètre sont les suivantes: Prélever 0,01 ml de semence pure et la diluer dans 4 ml de sérum physiologique formolé, puis homogénéiser la solution. Préparer l'hématimètre en pressant fortement la lamelle sur les côtés de la grille, après avoir nettoyé et séché soigneusement les surfaces concernées. Cette manipulation permet de faire adhérer la lamelle à l'hématimètre. Avec une pipette Pasteur, rincée au préalable avec la solution contenant les spermatozoïdes, déposer une petite goutte de solution sans bulle d'air, en bordure de la lamelle. La gouttelette, par capillarité, se répartit alors entre lame et lamelle. Laisser reposer quelques minutes afin que les spermatozoïdes se déposent sur le fond de la lame. Placer avec soin l'hématimètre sur la platine du microscope, sous contraste de phase avec un grossissement de 200. Le champ du microscope couvre généralement la surface d'un grand carreau. Compter au moins 10 grands carreaux par grille et trois à quatre grilles par éjaculat. L'utilisation d'un spectrophotomètre est la technique la plus efficace car elle allie rapidité et précision. Le principe général est de mesurer la densité optique de la solution saline formolée précédente, contenant les spermatozoïdes, et de la comparer à un blanc. Avant d'utiliser cette technique dans des conditions de routine, il est nécessaire d'obtenir une courbe standard en utilisant 20 à 50 échantillons de concentrations différentes et connues en spermatozoïdes, déterminées au préalable à l'aide de l'hématimètre.
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